建立并表征 LNCaP-TR-BoM：一株源自骨转移、具中间型 AR 减弱表型的前列腺癌细胞系

前列腺癌在雄激素受体（AR）通路靶向治疗下的演进跨越一条表型谱：一端持续依赖AR信号，另一端转为AR无关。流行病学显示约10-20%的前列腺癌患者会进展为去势抵抗性前列腺癌^[1]；在转移性去势抵抗性前列腺癌（mCRPC）中，AR改变较原发癌显著富集，62.7%的患者携带AR异常^[2]；而在经阿比特龙和/或恩扎卢胺治疗后进展的mCRPC中，17%可检出治疗中出现的小细胞神经内分泌前列腺癌^[3]，呈现谱系另一端的临床面貌。骨是临床上最重要的转移部位，AR剪接变异体在去势抵抗性骨转移中水平升高并与生存期短相关^[4]。然而，占据谱系中段——AR仍有表达但通路输出减弱——的实验模型相对稀缺；体外短期TNFα处理虽可经下调AR降低LNCaP细胞的雄激素敏感性^[5]，稳定的中间态模型依然不足。

针对模型稀缺的现状，作者将表达三模态报告基因的LNCaP细胞（LNCaP-TR）经心内注射接种裸鼠，从一只动物中段脊柱的骨病变取材并体外延续培养，建立亚系LNCaP-TR-BoM。二维与三维培养、RNA测序、qRT-PCR和免疫印迹的比较显示：与亲本相比，该亚系在单层培养中形成更多、更大的细胞聚集体，在悬浮和Matrigel三维培养中形成更大、更不圆整的球体；AR mRNA仅轻度下降、蛋白仍可检出，而KLK3的mRNA与蛋白降幅远超AR，残余KLK3仍可被恩扎卢胺和达罗卢胺抑制。转录组拟时序分析将其定位于亲本株与雄激素难治的LNCaP-RF之间，差异表达与通路富集显示其转录组重编程与临床mCRPC相一致，支持其作为临床相关模型。

作者进而以EPHA3示范该模型的发现价值：EPHA3在最具显著性的差异表达基因中折叠变化最大；经CRISPR-Cas9编辑、检测不到EPHA3蛋白的衍生株形成更小的聚集体和更小、更圆整的球体，提示EPHA3可能驱动AR中间态骨转移性前列腺癌的恶性表型。考虑到LNCaP最初建系自一名转移性前列腺癌患者的淋巴结转移灶^[6]，其基因组也已有短读长全基因组测序刻画^[7]，这一经体内骨病变选择、与亲本配对的亚系，为发现AR中间态骨转移的候选驱动基因提供了工具。

不过，该亚系源自单只动物的单个骨病变，EPHA3的作用目前也限于体外聚集与球体表型证据，其对体内生长、转移及临床骨转移行为的代表性和预测价值，仍有待后续工作检验。