Pannexin 1 缺失破坏细胞周期进程并损害黑色素瘤肿瘤结构

连接蛋白家族成员 Pannexin 1（PANX1）长期被视为一种通道蛋白：它在细胞凋亡最早阶段介导 ATP/UTP 等"find-me"信号的释放以招募吞噬细胞 ^[1]，而这一激活依赖效应 caspase 对其 C 端自抑制区的切割，使原本静默的通道开放 ^[6]。在黑色素瘤中，Panx1 的表达量与小鼠同源细胞系的侵袭性正相关，敲低后细胞向黑色素细胞表型逆转，鸡胚尿囊膜（CAM）移植瘤更小、肝转移减少 ^[5]。然而，PANX1 是否直接参与黑色素瘤细胞周期调控、以及它在三维肿瘤结构维持中的作用，此前并不清楚；而已知的黑色素瘤周期调控因子多集中在 MITF–p21–Rb1 轴 ^[2]、p16 抑癌蛋白 ^[3] 和 survivin ^[4] 等经典通路上。

这项研究用 CRISPR-Cas9 敲除或通道抑制剂丙磺舒处理 A375-P 细胞，均使细胞周期分布向 G2/M 期偏移；而另一种抑制剂螺内酯则不论 PANX1 是否表达，都把细胞周期阻滞在 G1/S 检查点。Bulk RNA 测序显示各种 PANX1 靶向策略均下调细胞周期相关基因的表达，且在 PANX1 缺失细胞中加用螺内酯时这一下调进一步加剧。在三维培养中，PANX1 的删除与抑制都破坏了肿瘤球的可压实性，表现为边界模糊、圆度下降；PANX1 敲除还增加肿瘤球碎裂，螺内酯处理使该表型加重，提示可能存在合成致死效应。液相色谱-质谱分析发现 PANX1 与 β-actin、F-actin 加帽蛋白亚基 α-1 等细胞黏附分子共免疫沉淀，暗示 PANX1 及其互作伙伴可能稳定细胞间接触。在 CAM 异种移植模型中，PANX1 敲除减小了肿瘤表面积并降低其活性。

相比此前 Panx1 敲低仅观察到移植瘤变小、转移减少 ^[5]，这项工作用完全基因删除加药理学抑制，把 PANX1 的作用从"影响生长、迁移、侵袭"细化到具体的细胞周期检查点和肿瘤物理结构层面，并把结构表型与黏附相关互作蛋白联系起来，为靶向 PANX1 治疗黑色素瘤提供了更明确的依据。值得注意的是，丙磺舒与螺内酯造成的检查点阻滞不同，提示两种抑制剂的药理作用并非完全等同。

当然，这只是基于单一 A375-P 细胞系的预印本结果，药物效应与 PANX1 敲除的叠加是否真正构成合成致死、PANX1 与细胞骨架蛋白的结合如何稳定细胞间接触，以及这些发现能否在体内和其他黑色素瘤模型中重现，都还有待解答。