WEE1通过抑制APC/CCDH1活性促进细胞由G0进入S期

细胞周期由CDK驱动，而WEE1长期以来被当作它的“刹车”：这一酪氨酸激酶通过磷酸化CDK1的Tyr15使其失活^[2,3]，由此构成的G2期检查点正是TP53突变肿瘤的软肋，WEE1抑制剂遂作为合成致死策略被推入多个适应症的临床试验^[1]，其中AZD1775联合卡铂在TP53突变患者中显示出增效的临床证据^[5]。但WEE1在G1/S阶段的作用始终含混：虽然不可磷酸化的CDK2 T14A;Y15F敲入小鼠和结直肠癌细胞在重返周期时更快进入S期，却一直缺乏WEE1影响CDK2的直接细胞学证据，在IMR90成纤维细胞中过表达WEE1也不改变G1/S时序；而人们已知APC/C^CDH1在G1期保持活性以允许复制起点许可、阻止过早复制，并在周期进入过程中经CDH1的磷酸化而被暂时失活^[4]。

作者先构建G1/S网络的影响图并转化为常微分方程模型，模拟预测WEE1降至50%会使CDK2提前激活、G1缩短。实验却给出相反答案：从CDK4/6抑制剂阻滞释放的hTert-RPE1细胞中加入AZD1775后，G1反而延长，48小时内不进入S期的细胞比例上升；siRNA敲低WEE1更严重，几乎无细胞进入S期；用doxycycline加IAA在1小时内降解内源WEE1同样如此（P<0.0001）。活细胞报告基因显示，WEE1抑制下CDK2活性更早、更高地攀升，细胞却仍滞留G1；而APC/C^CDH1失活的时点与速率和对照无异，提示决定S期进入时间的是APC/C^CDH1的关闭而非CDK2活性阈值。相应地，WEE1抑制显著缩短了以核内CDC6积累界定的许可窗口，并降低染色质结合的MCM7（P<0.0001）。

由此，论文把WEE1重新定位为S期进入的正调控因子：它通过压制APC/C^CDH1这一G1/S的关键拮抗者，保障细胞从静息状态及时重返周期，并鉴定CDH1（FZR1）为与周期调控相关的WEE1底物。这解释了模型预测与实验为何相反，也为WEE1抑制剂在细胞中的多效性影响及不明来源的临床毒性提供了线索。

当然，现有材料对机制的刻画止于“CDH1是WEE1底物”这一层，磷酸化如何改变APC/C^CDH1的功能、该通路在其他细胞类型和体内是否保守、能否直接解释临床试验中的毒性，仍待回答。