Citron 激酶通过控制可变剪接驱动前列腺癌生长

前列腺癌治疗以雄激素受体（AR）信号通路为核心，但转移性疾病的获得性耐药仍是主要临床挑战^[1]。可变剪接作为侵袭性前列腺癌的特征之一，其失调已被系统阐述，剪接体本身被视为可攻击的治疗脆弱点^[2]，AR-V7等雄激素受体剪接变异体驱动去势抵抗即为典型例证^[4]。本团队前期工作将AGC家族Ser/Thr激酶citron kinase（CIT）鉴定为致死性前列腺癌进展的关键驱动因子，其促癌作用完全依赖激酶活性^[5]；CIT在细胞分裂中的必要功能早在小鼠基因敲除模型中得到证实^[3]。然而CIT的磷酸化底物此前完全未知，选择性抑制剂又难以开发，小分子化合物无法复现CIT敲低所致表型^[6]，使直接靶向CIT一度陷入瓶颈。

本研究用可诱导表达激酶失活型CIT的异种移植模型验证了CIT激酶活性在已建立肿瘤中的必要性，并结合肽段阵列与现有激酶底物图谱的交叉验证，定义出一致性磷酸化基序（磷酸受体-5与-3位为精氨酸）。回顾既往质谱数据，作者发现37%的预测底物参与可变剪接，RNA-seq重分析也显示CIT调控近900个可变剪接事件。聚焦代表性底物THRAP3——主要剪接体组分——作者通过体外激酶实验确认S243为CIT直接催化的主要磷酸化位点。CLIP-seq发现THRAP3可结合3396个基因，其中311个为CIT依赖性（绝大多数在CIT沉默后下降），GO富集显示这些靶基因关联细胞分裂与胞质分裂，而CIT非依赖性靶基因则关联RNA加工；过表达野生型THRAP3改变880个剪接事件，磷酸化失活突变体S243A改变928个，两者间存在878个差异事件，提示S243磷酸化决定THRAP3的剪接底物谱。基于此，作者设计的反义寡核苷酸能在细胞系及PDXO中抑制前列腺癌生长而不影响良性细胞。

相比此前CIT底物谱空白、抑制剂难以成药的状态^[5][6]，本文将可变剪接这一已知肿瘤标志^[2]与CIT激酶活性对接，并提出通过反义寡核苷酸靶向下游CIT依赖性RNA结合事件的新策略，为治疗抵抗性前列腺癌提供了区别于直接抑制CIT的干预思路。

不过仍有问题悬而未决：CIT其他剪接相关底物的功能未明；反义寡核苷酸的体内递送效率近期遭同行评议工作质疑——三维基质胶结构可显著妨碍其在前列腺癌类器官中的递送^[7]；CIT/THRAP3依赖性剪接产物（如CPT1A v2）驱动生长的下游机制也仍待进一步剖析。