文献与产业新闻（bio-brief）· Nature Biotechnology·2026-09-01 12:00· 2026-09-01精选评分79

RT-qPCR 假象系统高估 RNA 靶向 CRISPR 报告的敲低率

A pervasive RT–qPCR artifact inflates RNA knockdown by RNA-targeting CRISPR

导读

约翰斯·霍普金斯大学吴斌团队发现，跨 gRNA 位点的 RT-qPCR 扩增子会与共纯化 gRNA 退火并抑制反转录，使 RNA 靶向 CRISPR 的敲低率被系统性高估，Csm、Psp Cas13b 与 CasRx 三套系统及 RNase 失活突变体均受波及。

推荐理由

原文发现跨 gRNA 位点的 RT-qPCR 扩增子会与共纯化 gRNA 退火，抑制反转录并系统高估 RNA 敲低率，并提出改用下游扩增子或 uMRT 的解决方案。