POCKIT Central iiPCR 平台对 MPXV Clade IIb 的诊断性能及 HIV 高流行队列病毒载量动态评估

自2022年起，猴痘病毒（MPXV）IIb支系引发的全球疫情已波及116个国家和地区，基因组监测研究也凸显了持续追踪各支系时空动态的必要性^[2]。在诊断方面，qPCR仍是金标准，此前已有多重qPCR方法用于MPXV检测与支系鉴别^[5]，面向中心化实验室的自动化高通量分子检测亦得到开发验证^[4]，但这类平台的基础设施要求限制了其在资源有限地区的可及性。为此，学界尝试了基于等温扩增联合CRISPR-Cas12a的快速床旁检测^[3]；隔离式等温PCR（iiPCR）的现场可部署性也曾在寨卡病毒检测中获得评估^[6]，然而iiPCR针对MPXV的临床验证数据依然有限。与此同时，疫情中超过35%的病例合并HIV感染，共感染对包括诊断在内的诊疗影响仍不清楚^[1]。

这项研究前瞻性纳入2023至2024年间24例qPCR确诊的猴痘患者，对多种类型标本同时使用POCKIT Central MPXV iiPCR系统和参考qPCR检测，并以系列病毒稀释评估分析灵敏度，以Ct值比较不同标本类型和症状出现后天数的病毒载量动态，辅以四基因Sanger测序进行系统发育分析。结果显示，iiPCR与qPCR的分析检测限完全一致，均为10⁻¹ PFU/mL，培养样本中定性结果完全吻合；皮损来源标本检出率最高（100%）且Ct值持续更低，非皮损标本阳性率更低且更不稳定；在接受抗逆转录病毒治疗（ART）的HIV感染者与未感染HIV者之间，未观察到基于病毒载量的诊断性能差异；测序证实该队列中仅流行IIb支系。

就已有认识而言，这项工作把iiPCR的现场检测证据从其他病毒^[6]延伸到MPXV真实患者队列，表明其诊断性能可与qPCR相当，尤其适用于皮损标本，为去中心化检测提供了直接支持，也呼应了学界对简易快速现场检测的需求^[3]。同时，它回应了HIV共感染对诊断影响这一开放问题^[1]：在这个HIV高流行、感染者均接受ART且免疫功能保留的队列中，合并HIV并未伴随诊断性能上的差异。检出的支系构成也与全球监测中IIb支系广泛流行的格局相符^[2]。

当然，研究样本仅24例，且HIV感染者均为经ART治疗、免疫状态保留的人群，未经治疗或免疫受损者中的表现仍属未知；非皮损标本检出率偏低且变异较大，提示现场检测的采样部位选择依然关键；iiPCR在更大规模和更多真实现场场景中的效果也有待进一步验证。