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流式细胞术入门：原理、补偿与应用（Malte Paulsen, EMBL）
流式细胞术入门（Malte Paulsen, EMBL）
导读
EMBL 的 Malte Paulsen 在 iBiology 主讲 34 分钟流式细胞术入门教程，介绍液流聚焦单列细胞、激光散射与荧光检测原理（FSC 反映大小、SSC 反映颗粒度）以及多激光下染料经二向色镜分通道检测、列表模式数据生成。教程还讲解光谱重叠时的补偿校正串扰，以及按 CD 分子或 DNA 含量同时分析数百万细胞、分群定量与分选的应用场景，是免疫表型与细胞周期研究的基础方法。
要点概括
iBiology 流式细胞术入门（Malte Paulsen, EMBL）：原理、荧光检测、补偿与数据。
- 原理：细胞在液流中被鞘液聚焦成单列，经激光散射/荧光检测；FSC（前向散射）反映大小，SSC（侧向散射）反映颗粒度/内部复杂度。
- 荧光染料 + 多激光：不同波长激发染料，经二向色镜/滤光片分至各检测器通道；电子信号转为列表模式（list mode）数据。
- 补偿（compensation）：当荧光光谱重叠时校正串扰，保证各通道互不干扰；数据离散度（spread）与荧光强度/分辨率相关。
- 应用：可同时分析数百万细胞，按表面标志（如 CD 分子、DNA 含量）分群、定量与分选；是免疫表型、细胞周期等的基础工具。
- 定位：实验方法教学，非科研结论。
来源：YouTube