磁珠法纯化 NGS 文库 DNA（AMPure/SPRI beads）

磁珠（常称 AMPure 或 SPRI beads）是羧基包被的磁性颗粒，悬浮在含 PEG 与氯化钠的溶液中；PEG/NaCl 让核酸从溶液里沉淀，并以磁珠为成核点结合，之后可用磁铁操控。

• 磁珠（常称 AMPure 或 SPRI beads）是羧基包被的磁性颗粒，悬浮在含 PEG 与氯化钠的溶液中；PEG/NaCl 让核酸从溶液里沉淀，并以磁珠为成核点结合，之后可用磁铁操控。
• 通过调节加入的 PEG 溶液比例，可以"调谐"结合不同大小的核酸，借此实现片段大小选择（size selection）。
• 标准流程：向样品中加入磁珠（溶液黏度高需缓慢吹打）→ 上下吹打或涡旋混匀（涡旋后离心收液）→ 室温孵育约 5 分钟，让核酸结合到珠面。
• 上磁架 2–5 分钟，待溶液澄清、磁珠贴到管壁背面后弃去上清（已不含样品）；随后用 80% 乙醇洗两遍（每遍静置 30 秒，勿扰动磁珠 pellet），尽量吸净残乙醇。
• 室温干燥约 5 分钟至磁珠不再"发亮"（若出现干裂的褐色块状需立刻下架并洗脱）；用洗脱缓冲液（水、低浓度 Tris 或 Tris-EDTA，不含高盐/PEG）重悬，30 秒后核酸重新进入溶液。
• 二次上磁更快（洗脱液不黏稠），吸出含纯化核酸的洗脱液即得干净样品；演讲者 Eric Chow（UCSF）全程在 Eppendorf 管与大磁架上演示该 NGS 建库纯化步骤。
• 定位：方法/NGS；非 AI。