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CRISPR 混合文库:优化敲除文库设计(addgene)
导读
addgene 网络研讨会讲解 CRISPR 混合筛选文库(全基因组敲除文库)的设计原则、载体系统与实验流程,可在单次实验中同时递送大量 gRNA,从基因组尺度追问「哪些基因贡献于某表型」。
要点概括
addgene 网络研讨会——CRISPR 混合筛选文库(全基因组敲除文库)的设计原则、载体系统与实验流程。
- 主线:CRISPR 混合文库筛选可在单次实验中同时递送大量 gRNA,在基因组尺度追问「哪些基因贡献于某表型」。
- 文库类型:条形码文库、cDNA/ORF 过表达文库、shRNA/RNAi 敲低文库,以及 CRISPR 文库;可全基因组或聚焦某一通路(如激酶)。
- 系统设计:最常见为 Cas9 + gRNA 双组件;可采用两载体系统(gRNA 文库与 Cas9 分开递送,Cas9 由稳定整合的第二质粒表达)。
- 定位:方法/基因筛选(Tier E addgene);非 AI。
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